蜂王浆粗蛋白质测定方法

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所属分类:蜂王浆

  蜂王浆粗蛋白质测定采用凯氏定氮法。

  

1、主要仪器:凯氏烧瓶(50毫升);半微量法蒸馏装置1套;滴定装置1套;万分之一天平。

  

2、试 剂

  (1)硫酸铜与硫酸钾混合剂 称取硫酸铜1克,硫酸钾10克,置于研钵中混合均匀,研细,备用。

  (2)混合指示剂 量取0.1%甲基红乙醇溶液2份,0.1%溴甲酚绿乙醇溶液3份,临用时混合。

  (3)2%硼酸吸收液 称取硼酸2克,量取混合指示剂2毫升、乙醇20毫升置于锥形瓶中,加蒸馏水稀释至100毫升。混合均匀,备用。

  (4)40%氢氧化钠溶液称取氢氧化钠40克,加蒸馏水溶解并稀释至100毫升。

  (5)稀硫酸浓硫酸5.7毫升,加蒸馏水稀释至100毫升。

  (6)0.1摩尔/升盐酸标准溶液

  ①配制 量取浓盐酸溶液9毫升,加蒸馏水稀释至1 000毫升。摇匀,备用。

  ②标定 精密称取在270 C~300C干燥至恒重的基准无水碳酸钠0.15克。置于150毫升锥形瓶中,加入蒸馏水50毫升,使其溶解,再加入甲基红、溴甲酚绿混合指示剂10滴,用盐酸溶液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时,煮沸2分钟,冷却至室温,继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色为终点。

  ③计算

  

3、操作步骤

  (1)消化精密称取蜂王浆试样l克,放人干燥的50毫升凯氏烧瓶中.加入硫酸钾混合剂,再沿瓶壁缓缓加入浓硫酸16毫升,充分混合,在瓶口放一小漏斗,使烧瓶成45°斜置,开始用弱火缓缓加热,使溶液温度保持在沸点以下,逐步加大火力,沸腾至溶液成澄清透明的绿色后,再继续加热30分钟,放冷备用。

  (2)蒸馏取2%硼酸溶液10毫升,置100毫升锥形瓶中,加入混合指示剂2滴和少量的稀硫酸,将冷凝管尖端浸入液面下,然后将凯氏烧瓶中内容物经由漏斗移入蒸馏瓶中,用少量蒸馏水淋洗凯氏烧瓶及漏斗数次,再加入40%氢氧化钠溶液25毫升,用少量蒸馏水冲洗漏斗数次,关闭漏斗与反应室的通道,加热瓶进行蒸汽蒸馏,当硼酸液开始由酒红色变为蓝绿色时,继续蒸10分钟后,将冷凝管尖端提出液面,使蒸汽继续冲洗1分钟,用少量蒸馏水淋洗尖端后,停止蒸馏。

  (3)滴定将吸收液用0.1摩尔/升盐酸标准溶液滴定至由蓝绿色变为灰紫色为终点,并做空白试验。

  

4、计算公式

历史上的今天:

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